Yazar "ALTUNTAŞ, Aynur" seçeneğine göre listele

Listeleniyor 1 - 3 / 3
  • Küçük Resim Yok
    Öğe
    Evidence for the control of aggrecanases by insulin and glucose in Alzheimer's disease
    (2014) AKYOL, Sümeyya; UĞURCU, Veli; ÇAKMAK, Özlem; ALTUNTAŞ, Aynur; YÜKSELTEN, Yunus; AKYOL, Ömer; SUNGUROĞLU, Asuman
    Amaç: Alzheimer hastalığı (AH) kişinin hafıza ve bilişsel becerilerini, hatta en sonunda en basit görevleri yapma becerisini bile yavaş yavaş bozabilecek geri dönüşümsüz ve ilerleyici bir beyin hastalığıdır. AHnın başlaması ve ilerlemesi, az anlaşılmış kompleks bir süreçtir. Bu çalışmada AHda diyabetle ilişkili olduğu düşünülen, beyin fonksiyonlarının bozulması açısından risk teşkil eden muhtemel bazı mekanizmalar araştırılacaktır. Yöntem: U87 (insan primer glioblastoma) hücrelerinin Dulbeccos modifiye Eagles ortamında kültürü yapıldı. Hücreler 48 saat süre ile insülin (10 ?g/ml), düşük miktar glukoz (11 mM, 2 mg/ml) ve yüksek miktar glukoza (55 mM, 10 mg/ml) maruz bırakıldı. Daha sonra harvest işlemi yapılarak protein izolasyonu gerçekleştirildi. Western blot membranları ve özel bir program ile primer anti-ADAMTS5, anti-IL-33, anti-NF?B, ve anti-GAPDH antikorları kullanılarak ilgili proteinlerin bantlarının tayini yapıldı ve bunların dansiteleri ölçülerek gruplar birbiri ile karşılaştırıldı. Bulgular: Western blot sonuçları insülin uygulanan U87 hücrelerinde ADAMTS5 proteininin azaldığını gösterdi. Düşük miktar glukoz uygulanması hücrelerde ADAMTS5 düzeylerinde orta derecede bir artışa yol açarken yüksek miktar glukoz uygulanması belirgin bir artışa yol açtı. Yüksek miktar glukoz uygulanan hücrelerde IL-33 protein düzeyinde açık bir indüksiyon tespit edilirken düşük miktar glukoz uygulanan grupta orta düzeyde bir azalma bulundu. İnsülin uygulanması ise IL-33 düzeyinde azalmaya neden oldu. NF?B ile immün reaksiyon veren antikorla yapılan muamelede insülin uygulanan hücrelerde NF?B protein düzeyinde keskin bir düşüş bulunurken düşük miktar ve yüksek miktar glukoz verilen gruplarda orta düzeyde bir azalma tespit edildi. Sonuç: Bu çalışma, U87 hücrelerinde aynı deneysel düzenek ile hem agrekanazlar hem de inflamasyon medyatörlerinin birlikte çalışıldığı ve sonuçlarının AH patofizyolojisiyle diyabet ve hipergliseminin birlikte yorumlanmaya çalışıldığı ilk çalışmadır. Çalışmanın sonuçları, insülin ve glukozun henüz bilinmeyen mekanizma(lar) ile ADAMTS, IL-33 ve NF?B sentezindeönemli fonksiyonlarıolabileceğini göstermektedir. Bütün agrekanazların ve diğer sınıf ADAMTS enzimlerinin yukarıdaki parametrelerle birlikte çalışılıp yorumlanacağı, ayrıca moleküler biyoloji, genetik, immunoloji ve diğer ilgili bilim dallarının ışığında AHda ADAMTS enzimleri ve inflamasyon medyatörlerinin patofizyolojiye katkılarının değerlendirileceği ileri çalışmalara ihtiyaç vardır.
  • Küçük Resim Yok
    Öğe
    Hydrogen Peroxide-Induced oxidative damage in human chondrocytes: The prophylactic effects of hypericum perforatum linn extract on deoxyribonucleic acid damage, apoptosis and matrix remodeling by a Disintegrin-Like and metalloproteinase with thrombospondin motifs proteinases
    (2014) AKYOL, Sümeyye; DEMİRCAN, Kadir; YÜKSELTEN, Yunus; ÇAKMAK, Özlem; UĞURCU, Veli; ALTUNTAŞ, Aynur; Gürler, Mukaddes
    Objectives: This in vitro study aimed to examine the protective roles of Hypericum perforatum Linn (HPL) extract on cell viability, DNA damage, apoptosis and a disintegrin-like and metalloproteinase with thrombospondin motifs (ADAMTS) proteins in chondrocytes induced by hydrogen peroxide (H2O2), as a model of chondrocytes subjected to reactive oxygen species (ROS) attack in rheumatoid arthritis and osteoarthritis. Materials and methods: Human chondrosarcoma cell line (OUMS-27) was used. Cells were incubated with different concentrations of methanolic extract (100, 400, and 750 μg/ml) of HPL for 36 hours, and then treated with 0.7 mM H2O2 for two hours. Trypan blue was used for evaluation of cell viability, while DNA damage was evaluated by alkaline Comet assay. Caspase-1, ADAMTS5, ADAMTS9, and glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) proteins were analyzed by Western blot. Results: In vitro H2O2 treatment decreased OUMS-27 cell viability. Cells pretreated with HPL at concentration of 400 μg/mL were best protected from H2O2 toxicity. Compared to 100 μg/ml concentration, pretreatment of cells with 750 or 400 μg/ml of HPL generated more protection against H2O2-induced DNA damage. Hydrogen peroxide application to the cells led to a slight increase in Caspase-1 expression, which shows no apoptosis. The most prominent increase in Caspase-1 level was shown in cells treated with 400 μg/ml of HPL extract. There was an increase in ADAMTS9 and a decrease in ADAMTS5 levels upon H2O2 administration. Pretreatment with HPL led to more decrease in ADAMTS5 level, indicating the protection of extracellular matrix attacked by these proteinases in cartilage tissue. Conclusion: It can be concluded that HPL has a potential to reverse the negative effects and processes induced by H2O2 in OUMS-27 cells and it can protect the surrounding cartilage area of chondrocytes from oxidative damage, which is suggested to be one of the main molecular factors accused for progression of rheumatoid arthritis and osteoarthritis.
  • Küçük Resim Yok
    Öğe
    The effects of insulin on the expression levels of ADAMTS6 & 19 in OUMS-27 cell
    (2014) UĞURCU, Veli; AKYOL, Sümeyya; ALTUNTAŞ, Aynur; Fırat, Rıdvan; KURŞUNLU, S. Fatih; ÇAKMAK, Özlem; DEMİRCAN, Kadir
    Amaç: A Disintegrin-like Metalloproteinase with Thrombospondin Motifs (ADAMTS) proteinleri ekstraselüler matrikste (ECM) bulunan bir çeşit matriks metalloproteinaz enzimidir. İnsulin birçok dokuda etki gösteren önemli bir anabolik hormondur. Bu çalışmanın amacı OUMS-27 insan kondrosarkom hücre kültüründe insülinin, fonksiyonları tam olarak bilinmeyen ADAMTS enzimlerinden ADAMTS6 ve 19 ekspresyonu üzerine zamana bağımlı olarak etkilerini değerlendirmek ve insülinin anabolik etkilerinden dolayı ADAMTS ekspresyonunu azaltma hipotezini test etmektir. Yöntemler: OUMS-27 hücrelerinin, 10 ?g/mL insulin içeren ve içermeyen Dulbeccos modified Eagle besiyerinde (DMEM) kültürü yapıldı. 11. güne kadar iki günde bir besiyeri ile birlikte insülin takviyesi yapıldı. Hücreler 1, 3, 7 ve 11. günlerde harvest edilerek uygun zamanlarda RNA izolasyonu yapıldı. ADAMTS6 ve 19 RNA ekspresyonları uygun primerler kullanılarak qRT-PCR yöntemi ile ölçüldü. Bulgular: qRT-PCR cihazının verilerine göre, insülin uygulanmasından 1 gün sonra başlamak üzere deneyin son günü olan 11. güne kadar ADAMTS6nın mRNA düzeyinde ciddi bir azalma meydana geldi (p=0.008). İnsülin uygulanan gruplarda ADAMTS6 oranı kontrol grubuna kıyasla 1/2 ve 1/4 aralığında değişti. İnsülin verilen hücre grubunda ADAMTS19 mRNA düzeyindeki değişiklikler ise kontrol grubuna kıyasla istatistiksel olarak anlamsızdı. Sonuç: Sonuçlarımız, insülinin ADAMTS6 düzeylerini azaltarak ekstrasellüler matriks bileşenlerinin kaybının telafi edilmesinde potansiyel bir etkisinin olabileceğini gösterdi. Bu hipotez ve bulgunun anlaşılması için yetim ADAMTS proteinlerinin gerçek fonksiyonlarının inceleneceği çok sayıda araştırma yapılmasına ihtiyaç vardır.